CARACTERIZAÇÃO CELULAR: PRINCÍPIOS E TÉCNICAS DE MICROSCOPIA, CITOMETRIA DE FLUXO E IMUNOFLUORESCÊNCIA
Palavras-chave:
Microscopia Óptica, Microscopia de Imunofluorescência, Microscopia Confotal, Citometria de Flux, Imunocitoquímica, AnticorposResumo
O presente capitulo teve como objetivo apresentar as duas principais técnicas para o estudo celular, a microscopia óptica, de imunofluorescência e confotal e a citometria de fluxo. Ambas têm técnicas específicas para preparação de amostras, mas todas se baseiam em técnicas imunológicas ou imunocitoquímicas. O capitulo traz os princípios de funcionamento desses dois equipamentos e suas variações, bem como o princípio das técnicas imunológicas e o princípio da fluorescência. O capitulo também traz conceitos e técnicas de preparo de amostras de imunocitoquímica, como também todos os procedimentos anteriores, sobre como são produzidos os diversos tipos de anticorpos e quais devem ser escolhidos para cada objetivo, se marcação da superfície celular, intracelular ou dentro de organelas e núcleo. Ao final de cada técnica é apresentado quais reagentes usar e como prepará-los.
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